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天津大學(xué)趙迎新教授團(tuán)隊(duì):利用3D生物打印技術(shù)構(gòu)建反硝化菌穩(wěn)定生態(tài)位以實(shí)現(xiàn)高效脫氮

時(shí)間:2025-06-03 10:38 來(lái)源:Environmental Advances 作者:admin 閱讀:
 

 



主要作者:劉一諾 博士研究生,趙天揚(yáng) 博士研究生(天津大學(xué))

通訊作者:趙迎新 教授(天津大學(xué))

論文DOI: 10.1016/j.watres.2025.123916


圖文摘要

 



成果簡(jiǎn)介

天津大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院趙迎新教授團(tuán)隊(duì)在Water Research上發(fā)表了題為“Construction of Stable Niches for Denitrifiers Using 3D Bioprinting for Efficient Nitrogen Removal”的研究論文。該研究利用微生物3D打印技術(shù)對(duì)好氧反硝化細(xì)菌進(jìn)行人工生態(tài)位的微尺度構(gòu)建,形成了具備穩(wěn)定生態(tài)位、高代謝活性與高機(jī)械強(qiáng)度的3D好氧反硝化活體材料,突破了傳統(tǒng)生物脫氮技術(shù)功能微生物生態(tài)位維持難的瓶頸問(wèn)題,為提升污水生物處理效能、推動(dòng)污水處理技術(shù)升級(jí)提供了創(chuàng)新性解決方案。

全文速覽

本研究利用微生物3D打印技術(shù)對(duì)好氧反硝化細(xì)菌在三維空間內(nèi)進(jìn)行人工生態(tài)位的微尺度構(gòu)建,形成了具備可控微孔結(jié)構(gòu)、動(dòng)態(tài)代謝反應(yīng)的3D好氧反硝化活體材料。研究結(jié)果證明,3D好氧反硝化活體材料對(duì)總氮和COD的去除率大于95%,污染物去除效能與10倍菌量的游離菌相當(dāng),末端污泥減量潛力巨大。相較于游離菌群,反硝化功能細(xì)菌相對(duì)豐度提升近60%,有效維持了反硝化菌群生態(tài)位。另外,3D好氧反硝化活體材料在低溫、寡營(yíng)養(yǎng)環(huán)境下仍能維持代謝活性,其展現(xiàn)的優(yōu)異結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性與功能可循環(huán)性特征,表明該材料在極端工況下具有可靠的環(huán)境適應(yīng)能力。這項(xiàng)研究證明了3D生物打印技術(shù)構(gòu)建具有理想細(xì)菌生態(tài)位的活性材料的可能性,及其實(shí)現(xiàn)高效廢水生物處理的潛力,從而為解決水環(huán)境污染提供有效途徑。

引言

工農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展導(dǎo)致水體硝酸鹽污染問(wèn)題日益嚴(yán)峻,過(guò)量硝酸鹽會(huì)引發(fā)水體富營(yíng)養(yǎng)化等環(huán)境問(wèn)題,持續(xù)威脅人類健康及生態(tài)系統(tǒng)安全。生物反硝化可將硝酸鹽還原為氮?dú)猓谠撛戆l(fā)展的活性污泥法、生物膜法等生物脫氮技術(shù),已成為當(dāng)前主流的脫氮工藝。然而,由于功能微生物的高流失率、環(huán)境抗逆性差以及生態(tài)位構(gòu)建周期長(zhǎng)等關(guān)鍵瓶頸,現(xiàn)有生物脫氮技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用中仍面臨顯著挑戰(zhàn),如何維持生物系統(tǒng)內(nèi)功能微生物的生態(tài)位穩(wěn)定性已成為亟需攻克的科學(xué)問(wèn)題。

圖文導(dǎo)讀

 

3D好氧反硝化活體材料構(gòu)建流程示意圖

 

 

Fig. 1. Construction process of 3D denitrification living materials.



以海藻酸鈉(SA)、明膠(Gel)和好氧反硝化菌作為主要成分,構(gòu)建新型雙網(wǎng)絡(luò)生物墨水(SAG Bioink),通過(guò)針頭擠出實(shí)現(xiàn)垂直堆疊,設(shè)定固定尺寸(20×20×5 mm)并調(diào)整打印參數(shù)(4 mm間隔/0.4 mm層高/10層)逐層構(gòu)建3D活體材料,該參數(shù)組合無(wú)需二次交聯(lián)即可維持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。完成打印后,經(jīng)2% CaCl₂溶液浸泡,SA發(fā)生鈣離子交聯(lián)形成第二層交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)。雙交聯(lián)體系賦予3D活體材料優(yōu)異機(jī)械強(qiáng)度,保障反硝化菌的穩(wěn)定代謝與增殖,這為構(gòu)建可控微生物生態(tài)位提供良好基礎(chǔ)。
 

3D打印生物墨水性能研究

 

 

Fig. 2. The different gelatin ratio of SAG bioink: 3D printing effects for suitable denitrifiers survival (a), Rheological properties (b), Steady-state viscosity (c) and Viscoelasticity properties (d).



優(yōu)化SAG生物墨水中SA/Gel配比,所得最優(yōu)生物墨水實(shí)現(xiàn)了良好的3D打印成型效果,以確保反硝化細(xì)菌生態(tài)位的穩(wěn)定保持。同時(shí),所設(shè)計(jì)的生物墨水具備良好流變特性,打印細(xì)絲可流暢擠出保持不坍塌,在保護(hù)菌體抗機(jī)械剪切的同時(shí)又可維持結(jié)構(gòu)完整性,為構(gòu)建兼具高細(xì)菌活性和機(jī)械強(qiáng)度的3D好氧反硝化活體材料提供保障。
 

3D好氧反硝化活體材料抵御復(fù)雜水力環(huán)境的機(jī)械性能分析

 

 

Fig. 3. The stress-strain curves of 3D SAG scaffolds (4%, 6% and 8% gel) under different Ca 2+ cross-linking time (a, b and c), The Young's modulus and fracture energy of 3D SAG scaffolds (4%, 6% and 8% gel) under different Ca 2+ cross-linking time (d, e and f).



CaCl₂二次強(qiáng)化交聯(lián)顯著提升了3D好氧反硝化活體材料的機(jī)械性能,其楊氏模量為0.1075 MPa,斷裂能為611.69 J/m,表明構(gòu)建的活體材料具備良好的極限強(qiáng)度、壓縮模量以及斷裂韌性。機(jī)械性能結(jié)果表明3D好氧反硝化活體材料在維持高細(xì)菌活性的同時(shí),仍能夠在長(zhǎng)期應(yīng)用中抵御復(fù)雜水力環(huán)境。
 

3D好氧反硝化活體材料物理特性與生物相容性

 

 

Fig. 4. The porosity (a), Water absorption (b) and Swelling rate (c). The microscopic surface and cross section structure of 3D bio-scaffolds with different bacterial concentration (a), CLSM analysis of 3D bio-scaffolds (b).



3D好氧反硝化活體材料具備良好的孔隙率、吸水率與溶脹率,凝膠基質(zhì)內(nèi)部形成了高效基質(zhì)輸運(yùn)通道。另外,毛細(xì)效應(yīng)驅(qū)動(dòng)的水/污染物擴(kuò)散滲透體系不僅持續(xù)供給反硝化菌代謝底物,更能有效排出代謝產(chǎn)物避免抑制效應(yīng),最終形成了適宜反硝化菌生態(tài)位的穩(wěn)定微環(huán)境。
 

3D好氧反硝化活體材料脫氮效能驗(yàn)證

 

 

Fig. 5. Denitrification performance of the 10%/20% 3D living materials and free bacteria group: COD removal (a), Nitrogen removal (b), Biomass change (c), Denitrification performance of the 3D living materials under different printing structures (d, e and f).



3D好氧反硝化活體材料對(duì)總氮和COD的去除率大于95%,其污染物去除效能與10倍菌量的游離菌相當(dāng)。微生物量的大幅度降低,減輕了后續(xù)污泥處置的負(fù)擔(dān),因此該技術(shù)污泥減量潛力巨大。與傳統(tǒng)包埋法相比,活體材料內(nèi)部的多通道結(jié)構(gòu)通過(guò)增強(qiáng)流體擾動(dòng)和降低傳質(zhì)梯度,提升了污染物與好氧反硝化菌群的接觸效率。與塊狀凝膠材料相比,在60小時(shí)內(nèi),3D反硝化活體材料的硝酸鹽氮去除率最高提升14.6%,COD去除率最高提升90.0%。
 

3D好氧反硝化活體材料的微生物群落分析

 

 

Fig. 6. The relative abundance of microflora at class level (a) The relative abundance of microflora at genus level (b) The analysis of FAPROTAX functional prediction (c).



得益于良好的傳質(zhì)效應(yīng)與生物墨水的親和性,3D好氧反硝化活體材料內(nèi)部碳氮代謝優(yōu)勢(shì)菌群實(shí)現(xiàn)了定向富集,主要反硝化功能菌相對(duì)豐度提升60%。相較游離菌群的單一群落,活體材料內(nèi)實(shí)現(xiàn)了穩(wěn)定生態(tài)位分化,通過(guò)多菌協(xié)同作用降低代謝負(fù)擔(dān)并強(qiáng)化環(huán)境脅迫抗性。該特性確保了復(fù)雜水環(huán)境中反硝化菌群的高活性維持,這能夠?yàn)樯锩摰夹g(shù)的可持續(xù)發(fā)展提供關(guān)鍵保障。

小結(jié)

本研究利用微生物3D打印技術(shù)構(gòu)建了穩(wěn)定的反硝化細(xì)菌人工生態(tài)位,通過(guò)增強(qiáng)菌群與污染物的接觸效率,有效突破了傳統(tǒng)固定化生物修復(fù)技術(shù)的傳質(zhì)限制。在接種量?jī)H為游離菌10%的條件下,仍實(shí)現(xiàn)了90%以上的氮素與COD去除率。這種增益效應(yīng)對(duì)降低污泥產(chǎn)量、提升技術(shù)經(jīng)濟(jì)性具有重要意義。該材料在4℃條件保存10天后仍具有70%以上活細(xì)胞存活率,彰顯其通過(guò)冷藏實(shí)現(xiàn)按需復(fù)用的潛力,為功能菌種儲(chǔ)存運(yùn)輸提供了傳統(tǒng)液態(tài)培養(yǎng)無(wú)法企及的解決方案。該制造方法可推廣至難降解有機(jī)物分解菌、重金屬回收菌及電活性菌等多種功能菌的生物打印,為推動(dòng)污水處理技術(shù)升級(jí)提供了創(chuàng)新性解決方案。

作者介紹

劉一諾:天津大學(xué)2023級(jí)博士研究生;
趙天揚(yáng):天津大學(xué)2024級(jí)博士研究生。

 


通訊作者:趙迎新,天津大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院英才教授,研究領(lǐng)域?yàn)槲鬯吞继幚砼c資源化,主要開(kāi)展生物碳氮協(xié)同控制、有毒物質(zhì)生物轉(zhuǎn)化、高級(jí)氧化技術(shù)研究。在生態(tài)環(huán)境領(lǐng)域主要期刊如Environmental Science & Technology,Water Research等發(fā)表論文80余篇,主持國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目、水專項(xiàng)子課題、國(guó)家自然科學(xué)基金等項(xiàng)目。研究成果成功應(yīng)用于60余項(xiàng)污水治理工程,取得了良好的環(huán)境效益。獲2024年天津市科學(xué)技術(shù)進(jìn)步二等獎(jiǎng),2023年天津市自然科學(xué)二等獎(jiǎng),2021年天津市科學(xué)技術(shù)進(jìn)步二等獎(jiǎng),2019年天津市優(yōu)秀城鄉(xiāng)規(guī)劃設(shè)計(jì)獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)等。入選國(guó)家級(jí)青年人才支持計(jì)劃(2022),天津市青年科技人才第一層次(2024),天津市青年人才托舉工程(2020)及天津市青科協(xié)優(yōu)秀青年科技工作者(2021)等。

通訊郵箱:
[email protected]


備注:
Construction of stable niches for denitrifiers using 3D bioprinting for efficient nitrogen removal Copyright 2025, Elsevier Inc
文章鏈接:

https://www.sciencedirect.com/sc ... 35425008243#sec0016


 

(責(zé)任編輯:admin)

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